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(2)引物引物設(shè)計?PCR引物設(shè)計大都通過計算機軟件進(jìn)行。到設(shè)計好的引物,也可以在本地計算機上運行引物設(shè)計專業(yè)軟件。(引物評價)>Serch>設(shè)置引物參數(shù)>OKBlast檢查引物特異...
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如果研究物種不存在可靠的參考序列(基因組或轉(zhuǎn)錄組),則可以使用從頭組裝來識別轉(zhuǎn)錄本,即無“參”轉(zhuǎn)錄組,沒有合適的參考序列,從頭組裝出轉(zhuǎn)錄本序列,再進(jìn)行轉(zhuǎn)錄本的定量。比如經(jīng)典的無參轉(zhuǎn)錄組先基于從頭組裝工...
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實驗過程為:目的基因查找比對→探針與引物設(shè)計→探針與引物合成→配置反應(yīng)體系→反應(yīng)參數(shù)→重復(fù)實驗,優(yōu)化條件→獲得曲線數(shù)據(jù),比對標(biāo)準(zhǔn)曲線→再重復(fù)驗證。將引物和探針互相進(jìn)行配對檢測,以避免二聚體和發(fā)卡結(jié)構(gòu)的...
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實驗過程為:目的基因查找比對→探針與引物設(shè)計→探針與引物合成→配置反應(yīng)體系→反應(yīng)參數(shù)→重復(fù)實驗,優(yōu)化條件→獲得曲線數(shù)據(jù),比對標(biāo)準(zhǔn)曲線→再重復(fù)驗證。引物設(shè)計原則:探針設(shè)計:另外循環(huán)參數(shù)雖然在引物和探針設(shè)...
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一般定量PCR實驗過程為:目的基因查找比對→探針與引物設(shè)計→探針與引物合成→配置反應(yīng)體系→反應(yīng)參數(shù)→重復(fù)實驗,優(yōu)化條件→獲得曲線數(shù)據(jù),比對標(biāo)準(zhǔn)曲線→再重復(fù)驗證。引物設(shè)計原則探針設(shè)計原則探針設(shè)計
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