只有套路，沒有彎路！你好，我是小白

如果想要利用/Cas系統(tǒng)敲除基因，或者激活/抑制基因轉(zhuǎn)錄dnastar引物設(shè)計(jì)，就必須涉及到sgRNA的設(shè)計(jì)。 明天，兩個(gè)sgRNA設(shè)計(jì)網(wǎng)站將處理所有序列的sgRNA設(shè)計(jì)！

說到這里，就必須要說到張峰大師了。 他自己建立的網(wǎng)站確實(shí)更新了很多功能。 然而不知為何，現(xiàn)在感覺繁瑣多了dnastar引物設(shè)計(jì)，網(wǎng)站打不開。

那你就只能另尋他法了。 因?yàn)橥ǔＰ枰膕gRNA要么是已知基因的質(zhì)粒設(shè)計(jì)，要么是非編碼區(qū)的質(zhì)粒設(shè)計(jì)。

1.已知基因的質(zhì)粒設(shè)計(jì)，推薦使用網(wǎng)站：

1、我們以小鼠Setd2為例，使用Cas9對(duì)其進(jìn)行激活表達(dá)。

2、選擇相應(yīng)選項(xiàng)后，點(diǎn)擊，稍等片刻，點(diǎn)擊下載結(jié)果。

3. 下載.txt 格式文件。 用 Excel 打開它。 紅框內(nèi)為Cas9系列。 基于載體引物（通常為BbsI）的限制性位點(diǎn)，將序列添加核酸內(nèi)切酶的粘端，合成質(zhì)粒，固溶后即可與載體連接。

2.非編碼區(qū)的質(zhì)粒設(shè)計(jì)，推薦使用網(wǎng)站：

1. 將設(shè)計(jì)質(zhì)粒的序列復(fù)制到框中。 這是一個(gè)隨機(jī)基因組的示例作為演示：

2. 點(diǎn)擊后，等待一段時(shí)間，然后選擇排名靠前的sgRNA進(jìn)行質(zhì)粒合成。

這兩個(gè)網(wǎng)站基本可以涵蓋所有關(guān)于sgRNA的質(zhì)粒設(shè)計(jì)，無論你是已知基因還是非編碼區(qū)，都可以搞定！

每次鏈接到外部鏈接時(shí)，都不會(huì)通過初審。 。 。 如果需要鏈接可以私信或者自行百度。

如有侵權(quán)請(qǐng)聯(lián)系刪除！